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靶基因筛查
浏览4585次 发布时间:2015-12-18

miRNA调控靶基因的生物信息学预测(技术服务-分子生物学-分子生物学整体服务)

服务流程:

使用至少三种以上的在线工具进行miRNAs靶基因的预测,并优选考虑在物种间具有高度保守特性的序列,结合蓝吉生物技术部特有的相关细胞功能基因数据库、致病基因数据库与miRNAs功能数据库提供的参考信息,作出最为接近真实的判断。

靶基因鉴定:luciferase报告基因表达载体的构建与检测(技术服务-分子生物学-分子生物学整体服务)

简介

miRNAs与靶基因的3’UTR结合后,主要抑制mRNA的翻译,可以Western Blot检测靶蛋白的表达水平;也有部分表现为对标靶mRNA的降解,可以采用qRT-PCR进行检测。但无论那一种方法,都不能有效说明是miRNAs直接作用的结果。直接的证据在于Sensor reporter的构建与活性检测,蓝吉生物的技术人员利用Promega特有psiCHECK质粒,对miRNAs与靶基因3’UTR的关系作出准确判断。

             

服务优势:

采用Promega公司特有psiCHECK质粒;

所采用的Luciferase双萤光报告系统,可以获得宽泛的线性定量范围与极高的灵敏度;

采用瞬时转染技术,操作简便、快速,周期短,适用于绝大多数细胞类型。

服务流程:

PCR扩增靶基因的3’UTR,或直接合成结合位点序列(1-3次重复);

将上述DNA片段克隆至报告载体psiCHECK质粒;

合成miRNA 模拟物;

将报告载体与miRNA模拟物共转待检细胞;

多功能酶标仪检测报告基因的表达水平。

 

2.3  miRNA反义锁核酸的瞬时转染(技术服务-分子生物学-分子生物学整体服务)

 

 

服务流程:

miRNAsLNA合成;

确定转染方案,并进行转染条件优化;

转染条件确定后进行正式实验;

按客户检测要求收集细胞样品进行下一轮功能检测实验;

向客户提交数据分析结果与实验报告。

 

服务流程:

PCR扩增靶基因的3’UTR,或直接合成结合位点序列(1-3次重复);

将上述DNA片段克隆至报告载体psiCHECK质粒;

合成miRNA模拟物;

将报告载体与miRNA模拟物共转待检细胞;

多功能酶标仪检测报告基因的表达水平。

miRNA反义锁核酸的瞬时转染(技术服务-分子生物学-分子生物学整体服务)

服务流程:

miRNAsLNA合成;

确定转染方案,并进行转染条件优化;

转染条件确定后进行正式实验;

按客户检测要求收集细胞样品进行下一轮功能检测实验;

向客户提交数据分析结果与实验报告。

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